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摘要：背景與目的環(huán)狀RNA(circular RNA, circRNA)是有別于傳統(tǒng)線性RNA的一類新型非編碼RNA(noncoding RNA,ncRNA),越來越多的研究提示circRNA可作為諸多惡性腫瘤的生物學(xué)標(biāo)志物,并成為治療的潛在靶標(biāo)。因此從circRNA角度挖掘肺腺癌新型分子靶標(biāo),將有助于揭示肺腺癌發(fā)生發(fā)展新機(jī)制,并為臨床診療提供新思路。本研究針對(duì)前期篩選出的一個(gè)肺腺癌組織高表達(dá)circRNA即circ0007766進(jìn)行體外生物學(xué)功能驗(yàn)證和分析,從而對(duì)circ0007766促進(jìn)肺腺癌增殖的相關(guān)機(jī)制進(jìn)行初步探索。方法首先通過qPCR檢測考察肺腺癌細(xì)胞中circ0007766的表達(dá)水平,然后采用siRNA干擾circ0007766的表達(dá),通過CCK8法、劃痕修復(fù)、PI單染和AnnexinV/PI雙染方法檢測circ0007766沉默表達(dá)對(duì)肺腺癌細(xì)胞的增殖、周期和凋亡作用的影響。此外,我們還采用qPCR和western blots方法初步研究了circ0007766在肺腺癌細(xì)胞中的生物學(xué)作用機(jī)制。結(jié)果 qPCR檢測表明肺腺癌細(xì)胞株中表達(dá)有circ0007766,在SPCA-1細(xì)胞中干擾circ0007766表達(dá),發(fā)現(xiàn)細(xì)胞增殖和遷移能力受到了抑制,細(xì)胞周期發(fā)生了G0/G1期阻滯,而細(xì)胞凋亡則不受影響。circ0007766的缺失并不影響其親本基因ERBB2的mRNA表達(dá),而對(duì)eIF4A3調(diào)控的細(xì)胞周期相關(guān)基因Cyclin D1/Cyclin E1/CDK4的mRNA和蛋白水平均有影響。結(jié)論本研究通過體外功能學(xué)研究,發(fā)現(xiàn)circ0007766可能對(duì)肺腺癌細(xì)胞增殖、遷移具有促進(jìn)的作用,進(jìn)一步的分子機(jī)制研究發(fā)現(xiàn)circ0007766可上調(diào)細(xì)胞周期關(guān)鍵蛋白Cyclin D1/Cyclin E1/CDK4的表達(dá),進(jìn)而促進(jìn)肺腺癌惡性增殖。本研究以circRNA為視角,將對(duì)肺腺癌發(fā)生發(fā)展機(jī)理及預(yù)后判斷提供新線索,為臨床治療應(yīng)用提供新靶標(biāo)。

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