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摘要：目的：探討外源性硫化氫（H2S）恢復(fù)缺氧后適應(yīng)對衰老H9C2細(xì)胞的保護(hù)作用及相關(guān)機(jī)制。方法：H9C2細(xì)胞（心肌細(xì)胞系）用30μmol/L過氧化氫（H2O2）處理2 h后再培養(yǎng)3 d,誘導(dǎo)生成衰老細(xì)胞。衰老H9C2細(xì)胞被隨機(jī)分5組（n=8）：正常組（Control）、缺氧/復(fù)氧組（H/R）、H/R＋NaHS組、缺氧后適應(yīng)（PC）組、PC＋NaHS組。缺氧/復(fù)氧（H/R）模型：衰老H9C2細(xì)胞用缺氧液（無血清、無糖培養(yǎng)基,p H=6.8）培養(yǎng)3 h,然后正常培養(yǎng)6h;缺氧后適應(yīng)（PC）模型：方法同H/R模型,缺氧結(jié)束復(fù)氧前連續(xù)進(jìn)行3次5 min間隔的復(fù)氧/再缺氧處理,隨后復(fù)氧6 h。ELISA試劑盒分別檢測大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物（AGEs）含量和caspase-3活性; CCK-8試劑盒檢測細(xì)胞活力; DCFH-DA染色檢測活性氧（ROS）水平; Hoechst 33342染色檢測細(xì)胞凋亡率; Real-time PCR檢測相關(guān)基因m RNA水平。結(jié)果：30μmol/L H2O2可誘導(dǎo)H9C2細(xì)胞衰老但不會導(dǎo)致其凋亡;與Control組比較,H/R和PC均降低細(xì)胞活力,增加細(xì)胞凋亡率、ROS水平及caspase-3、caspase-9和Bcl-2 m RNA水平（P〈0.01）;且PC組與H/R組比較,上述指標(biāo)變化無明顯差異;在H/R和PC組加入NaHS,可顯著提高細(xì)胞活力,降低細(xì)胞凋亡率和氧化應(yīng)激; PC＋NaHS對上述指標(biāo)的作用明顯強(qiáng)于H/R＋NaHS。結(jié)論：外源性H2S能夠恢復(fù)PC對衰老H9C2細(xì)胞的保護(hù)作用,其機(jī)制與抑制氧化應(yīng)激和細(xì)胞凋亡有關(guān)。

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