過表達(dá)趨化因子受體2促進(jìn)脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞對皮膚損傷的修復(fù)
摘要:目的 探討過表達(dá)趨化因子受體2(CCR2)是否能促進(jìn)脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(ADSCs)皮下移植對小鼠皮膚創(chuàng)傷修復(fù)的效率。方法 分離培養(yǎng)ADSCs,取3~5代細(xì)胞通過流式細(xì)胞技術(shù)檢測ADSCs相關(guān)的細(xì)胞表面標(biāo)志物CD73、CD105、CD44和CD31的表達(dá),并分別置于骨、軟骨和脂肪誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基中進(jìn)行誘導(dǎo)分化,檢測其多向分化潛能。通過慢病毒感染法構(gòu)建過表達(dá)CCR2的ADSCs。在實驗小鼠脊背兩側(cè)皮膚上分別制備一個面積為0. 8 cm×0. 8 cm的機(jī)械創(chuàng)面,隨機(jī)分成3組,分別皮下注射CCR2-EGFP-ADSCs、EGFP-ADSCs和磷酸鹽緩沖液(PBS)到小鼠創(chuàng)面4周。每天記錄創(chuàng)面愈合情況,并進(jìn)行病理切片觀察,與對照組對比分析。結(jié)果 分離培養(yǎng)的ADSCs高表達(dá)CD73、CD105和CD44,不表達(dá)CD31,具有骨、軟骨、脂肪誘導(dǎo)分化潛能。過表達(dá)CCR2的ADSCs構(gòu)建成功。小鼠皮膚創(chuàng)傷造模及移植細(xì)胞后,各組小鼠均存活,創(chuàng)面逐日縮小。CCR2-EGFP-ADSCs組、EGFP-ADSCs組和對照組第5、9天的創(chuàng)面愈合率分別為(68±3. 1)%和(91±2. 1)%、(63±2. 7)%和(87±2. 1)%、(58±3. 5)%和(80±2. 9)%。注射了ADSCs的兩組愈合率均顯著高于對照組(均P〈0. 05)。病理組織切片顯示3組小鼠第9天創(chuàng)面真皮層較正常皮層均有增厚,且CCR2-EGFP-ADSCs組觀察到明顯的類毛囊結(jié)構(gòu),多于EGFP-ADSCs組,對照組未觀察到類似結(jié)構(gòu)。結(jié)論 過表達(dá)CCR2可促進(jìn)ADSCs對皮膚損傷的修復(fù)。
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