大鼠主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞原代培養(yǎng)與鑒定
摘要:目的:建立一種可行的原代血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)培養(yǎng)方法。方法:嚴(yán)格無(wú)菌操作環(huán)境下取大鼠胸主動(dòng)脈及腹主動(dòng)脈中層組織,通過(guò)組織塊貼壁法進(jìn)行原代培養(yǎng),胰酶消化法進(jìn)行傳代,應(yīng)用倒置相差顯微鏡對(duì)不同培養(yǎng)時(shí)間的細(xì)胞進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察,使用免疫熒光法對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行鑒定。結(jié)果:原代培養(yǎng)第4~6天時(shí),組織塊周圍開(kāi)始有長(zhǎng)梭形細(xì)胞爬出;第7~9天時(shí),細(xì)胞爬出較少的呈網(wǎng)狀生長(zhǎng),組織塊周圍細(xì)胞爬出較多的呈漩渦狀生長(zhǎng),致密排列呈束狀;第10~14天時(shí),細(xì)胞呈典型的"峰—谷"樣結(jié)構(gòu),相互融合達(dá)80%,此時(shí)傳代細(xì)胞生長(zhǎng)速度增快,細(xì)胞變大,折光性減弱,免疫熒光染色鑒定可見(jiàn)VSMC特異性的α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SM-actin)表達(dá),表達(dá)的陽(yáng)性細(xì)胞在95%以上。結(jié)論:成功建立一種可行的原代VSMC培養(yǎng)方法。
注: 保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán),如需閱讀全文請(qǐng)聯(lián)系貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)雜志社