凡納濱對蝦細胞色素P450(CYP370C2)基因的克隆與表達分析
摘要：細胞色素P450(CYP)酶系在機體的毒素、污染物和藥物等代謝過程中發揮著重要作用,為深入了解對蝦CYP基因的結構和功能,采用c DNA末端快速克隆技術得到凡納濱對蝦Litopenaeus vannamei CYP家族基因CYP370C2的全長c DNA序列,共1 745 bp,包含1個1 464 bp的開放閱讀框,編碼487個氨基酸。CYP370C2基因序列中具有CYP蛋白特有的血紅素結合區、Ⅰ螺旋保守區、C螺旋保守區和K螺旋保守區。同源性比對結果顯示,凡納濱對蝦CYP370C2基因序列與三疣梭子蟹Portunus trituberculatus的CYP基因相似度最高,為64%。CYP370C2基因在所有檢測的組織中均有表達,在肝胰腺中的表達量最高,鰓和腸道次之。在48 h的氨氮脅迫試驗中,脅迫24 h后,肝胰腺和鰓中的CYP370C2基因相對表達量與對照組相比均顯著上調,分別在48 h和24 h達到峰值。脂多糖(LPS)注射后,CYP370C2基因在肝胰腺中的相對表達量在3 h開始顯著上升,在12 h達到最大值; CYP370C2基因在鰓中的表達在LPS注射后的3 h和6 h被顯著抑制,12 h恢復至對照組水平,隨后在24 h和48 h顯著上調。這些實驗結果顯示,CYP370C2基因參與了氨氮脅迫響應和LPS刺激響應,表明CYP370C2基因可能在凡納濱對蝦抗環境脅迫和抗病原體的免疫防御過程中均發揮重要作用。
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