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豬源結(jié)腸彎曲菌分離鑒定及細(xì)胞致死性膨脹毒素三重PCR分子檢測

李海利; 徐引弟; 方劍玉; 焦文強; 王治方; 張青嫻; 朱文豪; 王克領(lǐng); 郎利敏; 張立憲; 游一; 侯自花 河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所; 河南鄭州450002

摘要：為了探明河南省及周邊地區(qū)豬源結(jié)腸彎曲菌?。╟ampylobacteriosis）的流行情況，本研究對從省內(nèi)外的豬場和屠宰場采集的豬結(jié)腸及糞便樣品，進行了病原菌的初步分離培養(yǎng)鑒定。對結(jié)腸彎曲菌細(xì)胞致死性膨脹毒素（cytolethal distending toxin，CDT）A、B、C型毒素基因進行了單一PCR檢測與擴增，在此基礎(chǔ)上建立了結(jié)腸彎曲菌細(xì)胞致死性膨脹毒素A、B、c型三重PCR檢測方法。該三重PCR方法可同時擴增出結(jié)腸彎曲菌A、B、c毒素型基因，具有較好的特異性。從97份豬結(jié)腸樣品中分離128株細(xì)菌，經(jīng)16S rRNA基因擴增和結(jié)腸彎曲菌特異性引物PCR擴增，確定12株為結(jié)腸彎曲菌。本研究為豬源結(jié)腸彎曲菌的分離鑒定及結(jié)腸彎曲菌細(xì)胞致死性膨脹毒素A、B、c型毒素基因擴增提供基礎(chǔ)，可用于豬源結(jié)腸彎曲菌的鑒定及毒素鑒定、食品安全檢測與監(jiān)測等。

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