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肝靶向肽-抗腫瘤肽CSP-MDA-7/IL-24融合基因原核表達條件優化

陳瑜麗; 張晶晶; 馬艷; 盧雪梅; 劉文彬; 金小寶; 汪潔 廣東藥科大學生命科學與生物制藥學院; 廣東廣州510006; 廣東藥科大學基礎學院藥用生物活性物質研究所; 廣東廣州510006; 廣東省生物活性藥物研究重點實驗室; 廣東廣州510006

摘要:目的:優化肝靶向肽-抗腫瘤肽(CSP-MDA-7/IL-24)在大腸桿菌中誘導表達的相關條件。方法:通過考察CSP-MDA-7/IL-24重組菌生長曲線,選擇合適的誘導時機,通過SDS-PAGE檢測CSP-MDA-7/IL-24蛋白的表達量,單因素分析誘導時間、培養基p H值、誘導溫度和誘導劑IPTG濃度,在此基礎上各選取5個水平進行正交實驗,摸索最佳誘導表達條件。結果:培養基p H7.0、IPTG濃度0.12 mmol/L、培養溫度42℃、誘導表達4 h為重組蛋白的最佳表達條件。結論:為進一步制備重組蛋白CSP-MDA-7/IL-24及評價其生物活性奠定了基礎。

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