MSCs聯(lián)合EPCs在組織工程血管化中的作用研究
摘要:目的:探討間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)聯(lián)合內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs)體外促進(jìn)組織工程血管化.方法:利用全骨髓貼壁法結(jié)合差時(shí)貼壁法分離、擴(kuò)增小鼠骨髓來源的MSCs和EPCs,運(yùn)用流式細(xì)胞技術(shù)測(cè)定MSCs和EPCs的表面標(biāo)記物.取第3代MSCs和EPCs,分別按3×106個(gè)接種于無紡布聚乙醇酸支架(PGA)上后體外培養(yǎng)8周(MSCs+EPCs組按1.5×106個(gè)以1∶1的比例共同接種).細(xì)胞-支架復(fù)合物常規(guī)切片行HE染色,顯微鏡下觀察組織形態(tài).通過免疫組化染色評(píng)價(jià)CD31、CD34在各實(shí)驗(yàn)組中的表達(dá)情況.結(jié)果:組織形態(tài)學(xué)觀察可見MSCs+EPCs組的細(xì)胞數(shù)目及組織形態(tài)較MSCs組、EPCs組多且規(guī)則,PGA代謝產(chǎn)物已基本完全降解.免疫組化結(jié)果顯示CD31、CD34在MSCs組、EPCs組、MSCs+EPCs組中的染色得分為(1.67±0.82)、(1.33±0.52),(4.83±1.33)、(5.33±1.03),(8.67±0.52)、(8.00±2.45),各組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.結(jié)論:MSCs聯(lián)合EPCs體外可促進(jìn)組織工程血管化,并且其增殖分化和促血管生成能力高于單一培養(yǎng)組.
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