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小鼠、大鼠、食蟹猴與人的脂肪干細(xì)胞分離培養(yǎng)方法和生物學(xué)特性的比較分析

李珂雅; 石桂英; 高舒平; 白琳; 秦川 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所; 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院比較醫(yī)學(xué)中心; 國家衛(wèi)生健康委員會(huì)人類疾病比較醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 國家中醫(yī)藥管理局人類疾病動(dòng)物模型三級(jí)實(shí)驗(yàn)室; 北京100021

摘要:目的 比較分析實(shí)驗(yàn)動(dòng)物脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs)與人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)方法和生物學(xué)特性的差異,為自體脂肪干細(xì)胞移植治療人類疾病的臨床前研究提供臨床前的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和方法。方法 將臨床患者、食蟹猴、C57小鼠和SD大鼠的皮下脂肪組織進(jìn)行分離培養(yǎng)后得到人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(hADSCs)、食蟹猴脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(cynomolgus monkey adipose-derived mesenchymal stem cells,cADSCs)、小鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(mouse adipose-derived mesenchymal stem cells,mADSCs)和大鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(rat adipose-derived mesenchymal stem cells,rADSCs);采用流式細(xì)胞術(shù)鑒定ADSCs表面標(biāo)記物;細(xì)胞成脂、成骨誘導(dǎo)分化,于誘導(dǎo)后21 d和28 d固定染色,鑒定ADSCs的成脂成骨分化能力。結(jié)果 hADSCs、cADSCs、mADSCs和rADSCs的分離培養(yǎng)方法類似,貼壁培養(yǎng)后均呈成纖維細(xì)胞樣生長;流式檢測(cè)顯示,不同物種ADSCs間充質(zhì)干細(xì)胞表面標(biāo)記物CD90、CD29為陽性,少量表達(dá)造血干細(xì)胞標(biāo)記物CD34,血管內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)記物CD31為陰性。成脂和成骨分化能力檢測(cè)顯示,hADSCs、cADSCs、mADSCs和rADSCs和均具有成脂成骨分化能力,但其成脂成骨分化的時(shí)間略有差異。結(jié)論 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物ADSCs與hADSCs采用相同的分離培養(yǎng)方法,有類似的表面標(biāo)記物表達(dá)及成脂成骨分化潛能,生物學(xué)特性具有一致性,是自體脂肪干細(xì)胞移植臨床前研究的良好模型。

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