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檢測豬鼻支原體抗原的ELISA方法的建立及其應用

朱紅振; 危艷武; 黃立平; 劉丹; 夏德利; 吳洪麗; 邊海橋; 馮力; 劉長明 中國農業科學院哈爾濱獸醫研究所獸醫生物技術國家重點實驗室; 黑龍江哈爾濱150069

摘要：為了建立檢測豬鼻支原體(Mhr)抗原的ELISA方法,本研究采用雜交瘤技術制備了抗Mhr菌體的特異性單克隆抗體(MAb),經親和層析純化后標記辣根過氧化物酶(HRP),建立了一種能夠檢測Mhr抗原的ELISA方法。ELISA反應條件優化結果為:HRP標記的MAb最適稀釋度為1∶1000,該方法的批內和批間變異系數均小于6%,經超聲波處理Mhr抗原效果更佳,最低抗原檢出量為25ng。用該方法對已知豬肺炎支原體(Mhp)、豬圓環病毒2型(PCV2)抗原檢測無交叉反應。本研究建立的檢測Mhr抗原的ELISA方法具有良好的特異性、敏感性和重復性,可為Mhr體外培養物抗原定量檢測提供可靠的技術手段。

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