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摘要：目的實驗測評DEHP及其主要代謝產(chǎn)物MEHP暴露對MLTC-1細(xì)胞類固醇激素合成關(guān)鍵基因表達(dá)的影響。方法將MLTC-1分別暴露于DEHP（0,1,10,100,1 000μmol/L）和MEHP（0,1,10,100,1 000μmol/L）24 h,采用Annexin V/PI雙染法測定細(xì)胞凋亡,并應(yīng)用熒光定量PCR法分析細(xì)胞類固醇激素合成過程中涉及關(guān)鍵酶的基因表達(dá)水平。結(jié)果凋亡實驗結(jié)果顯示DEHP（100和1 000μmol/L）和MEHP（10和1 000μmol/L）顯著誘導(dǎo)MLTC-1細(xì)胞晚期凋亡的發(fā)生,1 000μmol/L DEHP和MEHP顯著降低了MLTC-1活力。所以本研究采用了較低的染毒濃度（1,10和100μmol/L）對MLTC-1染毒24 h來評估DEHP和MEHP對MLTC-1類固醇合成通路的影響。熒光定量結(jié)果顯示1μmol/L DEHP顯著增加MLTC-1 CYP17A1基因表達(dá)水平,而100μmol/L DEHP顯著抑制MLTC-1 CYP17A1、CYP11A1和SF-1基因表達(dá)水平。10μmol/L DEHP顯著增加MLTC-1外CYP1A1基因表達(dá)水平。100μmol/L DEHP顯著抑制MLTC-1黃體激素受體LHR基因表達(dá)水平。1μmol/L MEHP顯著增加MLTC-1 3β-HSD基因表達(dá)水平。然而MEHP對類固醇激素合成過程中一些酶如STAR、CYP17A1、CYP11A1、重要調(diào)節(jié)因子胰島素樣激素3 INSL-3、SF-1、關(guān)鍵受體AR和LHR基因表達(dá)水平均無顯著影響。結(jié)論 DEHP和MEHP誘導(dǎo)MLTC-1凋亡,DEHP和MEHP都可影響MLTC-1細(xì)胞類固醇激素合成過程中關(guān)鍵基因的表達(dá),從而引起內(nèi)分泌干擾。

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