血管內皮生長因子受體KDR基因胞外段1—3區基因轉染抑制氧誘導小鼠視網膜新生血管的研究
摘要：目的評價脂質體介導的血管內皮生長因子受體KDR基因胞外段1-3區（KDRn3）基因轉染抑制氧誘導的視網膜新生血管的效果。方法選1周齡C57Bl／6N小鼠置于氧濃度為75％±2％的氧箱中5d。回到正常環境中誘導視網膜新生血管模型。在小鼠離開氧箱的當日，向轉染組小鼠玻璃體腔注射脂質體pEGFP—N1／KDRn3復合物1μl；脂質體對照組注射等量脂質體；空白對照組小鼠注射等量PBS。回到正常環境中后5d，采用視網膜鋪片及視網膜冰凍切片在激光共聚焦顯微鏡下觀察綠色熒光蛋白在視網膜的表達；采用熒光標記的右旋糖酐血管灌注下視網膜鋪片方法觀察視網膜新生血管的分布并測量無灌注區面積；組織學切片觀察比較突破視網膜內界膜的血管內皮細胞數量。多組比較采用方差分析，有統計意義后進行兩兩比較的叮檢驗。結果轉染組視網膜鋪片見視網膜局部散在點狀綠色熒光信號，空白對照組與脂質體對照組未見綠色熒光信號；視網膜冰凍切片見轉染組視網膜神經節細胞層、內核層部分細胞胞質內見綠色熒光表達，空白對照組與脂質體對照組視網膜各層未見綠色熒光表達；視網膜鋪片觀察可見空白對照組與脂質體對照組在無灌注區邊緣均可見新生血管芽及熒光滲漏，轉染組見新生血管芽明顯減少，生后第17天A、B、C3組新生血管模型小鼠各組視網膜無灌注區面積分別為（1．33±0．49）、（2．75±0．70）、（2．12±0．35）mm^2，組間比較差異有統計學意義（F=17．61，P〈0．01）。正常對照組及A、B、C組視網膜表面突破內界膜的血管內皮細胞核計數分別為0．20±0．51、13．58±2．48、23．05±3．40及21．70±2．89，組間比較差異有統計學意義（F=1085．25，P〈0．05）。結論pEGFP—N1／KDRn3基因轉染可不同程度抑制氧誘導C37B1／6J小鼠視網膜新生血管的生長。
注: 保護知識產權,如需閱讀全文請聯系中華眼科雜志社
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