CLARITY技術(shù)在小鼠急性腎損傷模型中的應用
摘要:目的 基于小鼠急性腎損傷模型探討CLARITY技術(shù)在病理診斷中應用的價值。方法 將24只昆明小鼠隨機均分為實驗組和對照組,每組(各12只)分別建立左側(cè)輸尿管完全梗阻模型,0d、2d、4d、6d后每次取3只實驗組小鼠進行透明化處理,對照組行常規(guī)HE染色。聯(lián)合應用肉眼觀察法、激光共聚焦顯微鏡觀察法和常規(guī)顯微鏡觀察法檢測腎臟組織的形態(tài)學改變。采用TissueFAXSTMCytometry組織細胞定量分析系統(tǒng)對共聚焦顯微鏡二維圖片中的腎小管上皮細胞數(shù)量和腎小管管腔面積進行定量分析。結(jié)果 肉眼觀梗阻側(cè)腎臟,隨著時間延長,腎體積增大、充血、水腫,腎盂和輸尿管擴張,腎實質(zhì)結(jié)構(gòu)逐漸萎縮,腎盞融合,腎皮質(zhì)開始變薄;實驗組和對照組均觀察到腎臟梗阻后腎小管上皮細胞扁平化、擴張,隨著梗阻時間延長,逐漸出現(xiàn)腎小管萎縮消失、組織結(jié)構(gòu)破壞,典型形態(tài)消失,纖維結(jié)締組織增生,腎臟出現(xiàn)纖維化;實驗組采用激光共聚焦顯微鏡掃描發(fā)現(xiàn)同一個組織的不同層面腎小管上皮細胞數(shù)量和腎小管管腔面積分布明顯不同。結(jié)論 透明化技術(shù)可觀察急性腎損傷后腎臟不同組織層面的病理改變,比HE染色的二維層面提供更多的信息,在病理學和形態(tài)學研究領域有較高的應用價值。
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